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慢雷竞技|电竞竞猜平台介导基因组编辑

服务简介:

   基因组编辑技术目前常用的是CRISPR/Cas9和TALEN,而CRISPR/Cas9被使用的更为广泛。通过设计sgRNA(short guide RNA),以引导Cas9对DNA的定点切割,造成DNA双链的断裂,然后细胞可以利用非同源末端连接(Non-homologous End Joining,NHEJ)或者同源重组(Homologous Recombination, HR)方式实现基因敲除或对基因精确编辑的目的。

 

Cas9蛋白的CDS长达4KB,克隆难度和包毒难度都相对大,将Cas9基因高效导入细胞是应用Cas9 / CRISPR系统进行基因敲除的难点之一,极大地限制可供选择的将基因导入细胞的方法。并且在用CRISPR / Cas9系统进行基因敲除时,还需要同时转入识别靶点的gRNA,筛选阳性细胞的抗性基因或荧光基因,用同源重组法进行基因敲除,还需要导入同源重组模板。如此多的基因共同表达,很难得到较高的基因编辑效率,造成后续的阳性克隆筛选和检测工作难度大。

 

慢雷竞技|电竞竞猜平台具有感染范围广、持续表达等特点,主要用于难感染的细胞转染,如干细胞、免疫细胞(如DC细胞)和肿瘤细胞等。慢雷竞技|电竞竞猜平台的转染效率高和能持续表达的特点促进了基因组编辑的效果。

 

根据客户提供的基因信息,设计sgRNA序列,再将sgRNA片段构建到慢雷竞技|电竞竞猜平台载体,生产的雷竞技|电竞竞猜平台颗粒可以直接用于感染细胞或者动物实验。

 

服务流程:

 

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服务优势:

A,实验方案设计更灵活由于不必表达大蛋白Cas9,可以根据细胞特性选择化学转染,腺雷竞技|电竞竞猜平台,腺相关雷竞技|电竞竞猜平台等多种方法导入或敲除相关基因。

B,提高基因敲除效率在稳定表达Cas9蛋白的细胞系上进行基因敲除比瞬时转染Cas9进行基因敲除的效率更高。

C,可对同一细胞进行多个基因敲除实验。对于需要在同一个细胞系中进行多个基因的编辑或需要长期用一个细胞模型进行多项基因研究,先构建一个Cas9蛋白稳定表达的细胞系可显着提高后续实验的效率,降低实验难度。

D,基因敲除效率比直接质粒转染更高;

E,提供多种不同荧光和抗性标记的慢雷竞技|电竞竞猜平台表达载体,更易筛选到基因敲除成功细胞;

F,接受cas9蛋白稳定表达不同细胞系定制。


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